登革熱試劑盒是用來定性檢測人血清、血漿和全血中的登革熱病毒IgM和IgG抗體的方法。這方法能用來鑒別初次和二次感染。它僅能用來檢測具有臨床登革熱癥狀的病人的樣本。
登革熱是登革病毒經蚊媒傳播引起的急性蟲媒傳染病。臨床表現為高熱、頭痛、肌肉、骨關節劇烈酸痛、皮疹、出血傾向、淋巴結腫大、白細胞計數減少、血小板減少等。是東南亞地區兒童死亡的主要原因之一。
登革熱試劑盒在處理病人樣本時,登革熱特異性IgM和IgG抗體和包埋在橫過盒膜的兩條線上的抗-人IgM和IgG抗體相結合。膠態金復合物包含重組登革熱1~4型抗原被病人的IgM和IgG捕獲而顯現出粉紅色的線。設定一個對照程序來指示方法操作正確。結果是假定陽性的,必須經病毒分離、雙份血清分析、免疫組織化學檢測抗原或病毒核酸檢測證實有登革熱病毒感染。
登革熱檢測方法:
實驗開始之前仔細閱讀操作步驟,嚴格遵守操作步驟才可以獲得可靠的實驗結果。如果這實驗是在ELISA自動系統上進行,為了避免洗板的影響,建議在洗板步驟時,洗板3次改成洗板5次,洗滌液從300µl增加到350µl。實驗開始之前,應當在試劑盒提供的結果單上標記好所有的樣品和質控品。取適當數量的板條置于板架上。
請至少做以下幾個孔:
1孔(例A1)做空白對照孔;
1孔(例B1)做陰性質控;
2孔(例C1+D1)做臨界質控;
1孔(例E1)做陽性質控。
建議將質控和病人樣品做雙份檢測。照說登革熱試劑盒明書給出的實驗步驟進行操作,并避免不同步驟之間的時間隔無明顯差別。加每一質控品和樣品時都應當用新的取樣吸頭。把恒溫箱調至37±1℃。