西尼羅河檢測試劑可用于定性檢測人血清中的西尼羅病毒IgM抗體,用于臨床實驗室診斷臨床上有與腦膜腦炎癥狀相的病人西尼羅病毒的感染。陽性的結果必需用蝕斑減少中和試驗(PRNT)來證實,或者使用現有的CDC的的指南來確診該疾病。
西尼羅河熱(WestNilefever)是由西尼羅病毒經蚊子傳播的急性發熱性疾病可侵犯中樞神經系統,引起腦炎。在非洲南歐、中東、中亞和西亞大洋洲等地呈地方性流行。臨床表現主要有發熱、皮疹和淋巴結腫大侵犯中樞神經系統,可產生腦炎癥狀。
西尼羅河檢測試劑基于雙夾心法原理:未知的樣本與質控品加入到微孔(包被有抗人IgM)中進行溫育,樣本中的特異性抗體會結合到微孔板上。洗板之后分別加入西尼羅河病毒抗原(WNRA)和普通細胞抗原(NCA)進行反應。
再次洗板后加入酶聯物,用于檢測所結合的抗原。三次洗板后加入底物液,一段時間后加入終止液終止顏色反應,溶液變為黃色。450nm下測量OD值。結果中WNRA與NCA的比值ISR可用于結果的判定。
在使用前將所有試劑和樣品平衡至室溫,并輕輕倒轉使其充分混勻。將10X的濃縮洗滌液稀釋,將120ml的濃縮洗滌液加上1080ml的蒸餾水,搖勻,至無任何沉淀,稀釋好的洗滌液可在室溫下放置兩個星期。
準備實驗所需的板條,剩余的板條應盡快放入袋子里重新密封,在2-8℃下儲存至保質期。