- 產品描述
熱帶病西尼羅河抗原檢測試劑
廣州健侖生物科技有限公司
檢查
1.實驗室檢查
白細胞數減少,腦炎型者腦脊液中淋巴細胞增多,蛋白增高。
2.免疫學檢查
利用血清學抗體檢測方法,常用ELISA(酶聯免疫吸附實驗)法,采用患者急性期和恢復期雙份血清,兩份血清同時進行檢測,以恢復期血清較急性期特異性IgG抗體滴度升高4倍以上為陽性,有助于本病的診斷。
3.病原學檢查
自潛伏末期至發病后第5天,從患者血液或腦脊液中分離出病毒,陽性率較高,對新分離病毒的鑒定一般采用已知血清進行中和實驗。
4.分子生物學檢查
RT-PCR(逆轉錄-聚合酶鏈反應)法檢測,通過設計西尼羅河熱病毒特異引物對血清或腦脊液標本進行RT-PCR試驗,陽性率高,具有特異性診斷價值。
用途
西尼羅(WN)病毒IgG ELISA,利用了西尼羅重組抗原檢測人體血清或血漿中的西尼羅抗體。本實驗僅用于輔助診斷人感染了西尼羅病毒,不用于篩查血液或血液成分。僅供專業人員體外診斷使用。
概述
感染了西尼羅病毒會導致包括腦炎等一系列癥狀的疾病,西尼羅病毒在世界廣泛傳播,已在50多個國家檢測出該病毒。本試驗經CDC提供的試劑檢驗與驗證。本試驗使用了一種稱為WNRA的重組抗原,它可以作為西尼羅病毒感染的快速血清學指標,WNRA蛋白是一種重組抗原,它是由含有西尼羅病毒兩個抗原的序列多肽構成。
實驗的原理
檢測西尼羅病毒IgG ELISA 是基于兩步夾心法原理制造的。
提供的材料
- 微孔板(96孔 12x8):即用 每孔均包被結合西尼羅重組抗原的單抗。2-8℃下保存至保質期。
注意:WNRA和NCA已包被于微孔板。
- IgG樣品稀釋液:1支 25ml 即用 2-8℃下保存至使用。
- IgG陰性質控:1支 30ul 2-8℃下保存至使用。要長時間儲存,將其分裝于小瓶里,在-70℃下儲存。
- IgG陽性質控:1支 30ul 2-8℃下保存至使用。要長時間儲存,將其分裝于小瓶里,在-70℃下儲存。
- 洗滌液(10X):1瓶 120ml 2-8℃下保存至使用。
- EnWash:1瓶 20ml 2-8℃下保存至使用。
- 酶聯物:一瓶6ml 即用 2-8℃下保存至使用。
- TMB底物液: 1支 9ml 即用 2-8℃下保存至使用。
- 終止液;1支6ml 即用 2-8℃下保存至使用。
試劑應避免反復凍融。
西尼羅河病毒熒光玻片法檢測試劑盒
西尼羅河病毒熒光玻片法檢測試劑盒
西尼羅河間接免疫熒光法檢測試劑盒
西尼羅河間接免疫熒光法檢測試劑盒
熱帶病西尼羅河抗原檢測試劑
操作步驟:
- 標記將要使用的板條,注意微孔板已經按照統一排列,如下所述包被西尼羅抗原和質控抗原。
西尼羅抗原 |
| |
板條#1 | 板條#2 | |
A | WNRA | WNRA |
B | WNRA | WNRA |
C | WNRA | WNRA |
D | WNRA | WNRA |
E | NCA | NCA |
F | NCA | NCA |
G | NCA | NCA |
H | NCA | NCA |
- 將血清樣品﹑陰性質控和陽性質控同樣地用樣每孔加入50ul稀釋后的樣品,以下為一個血清樣品使用一個板條的*。
- 品稀釋液按1:300稀釋。
| 板條1 | 板條2 | |
血清樣品 | |||
A | IgG N | 樣品1 | |
B | IgG N | 樣品1 | |
C | IgG P | 樣品2 | |
D | IgG P | 樣品2 | |
E | IgG P | 樣品2 | |
F | IgG P | 樣品2 | |
G | IgG N | 樣品1 | |
H | IgG N | 樣品1 |
- 封板,在濕潤的溫育器里37℃下溫育1小時。
- 溫育后,用自動洗板機,使用洗滌液洗板6次。
- 在每孔中加入50ul的酶聯物。
- 封板,在濕潤的溫育器里37℃下溫育1小時。
- 溫育后,用自動洗板機,使用洗滌液洗板6次。
- 每孔加入150ul的EnWash,在室溫下溫育5分鐘
- 溫育后,用自動洗板機,使用洗滌液洗板6次。
- 每孔加入75ul的TMB底物液。
- 封板,在室溫下,避光處溫育10分鐘。
- 每孔加入50ul的終止液終止反應。
- 在450nm處讀取吸光率。
結果的計算
結果的變化將會非常大,以下結果僅供指引。
計算ISR值:
計算在同一實驗里WNR抗原的兩個陰性質控的平均值,計算同一實驗里NC抗原的兩個陰性質控的平均值,用WNRA/NCA,得出陰性質控的ISR值。同樣地計算陽性質控和樣品得ISR值,陽性質控的ISR值應高于3.0,陰性質控的ISR值應低于1.5。
結果的判斷:
ISR | 結果 | 解釋 |
≤2.0 | 陰性 | 沒有檢測到IgG抗體 |
2.0-3.0 | 可疑 | 需確證實驗 |
≥3.0 | 陽性 | 存在IgG抗體,建議做確定性實驗 |
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肺炎鏈球菌6、14、19及23型,常引起兒童 肺炎鏈球菌性疾病。40%~70%的正常人上呼吸道中攜帶有 毒力的肺炎鏈球菌。由此可見呼吸道粘膜對肺炎鏈球菌存 在很強的自然抵抗力。當出現某種降低這種抵抗功能的因 素時,肺炎鏈球菌可引起感染,如①呼吸道功能異常:病 毒及其它感染性因子損傷呼吸道粘膜上皮細胞;某些異常 因素(如過敏)導致粘液的過度分泌,使侵入的病原菌受 到保護;各種原因導致的支氣管阻塞及各種原因導致的纖 毛功能損傷;②酒精及藥物中毒:酒精及某些藥物中毒可 抑制吞噬細胞的活性及咳嗽反射,有利于病原菌的吸入; ③循環系統功能異常及任何原因導致的肺充血、心功能衰 竭;④其它:營養缺陷、體質虛弱、貧血、血清補體水平 低下等。肺炎鏈球菌肺炎常突然發病,表現為高熱、寒戰 、胸膜劇烈疼痛、咳鐵銹色痰。10%~20%的患者可于高熱 期伴發菌血癥。其病理表現主要是zui初肺泡內有大量纖維 蛋白滲出液,繼之是紅細胞和白細胞向肺泡內滲出,zui終 導致病變部位肺組織實變。病變通常僅累及單個肺葉,故 稱為大葉性肺炎。如果早期使用抗生素治療,可阻止肺實 變發生。